一、体液常规形态学检查概述
形态学检查价值
•形态学检验是检验学科最基本的技能，是临床实验室诊断最简便、最特异和最实用的常规检验方法和检验内容。
•形态学检验是某些疾病诊断的“金指标”，是判断疾病疗效和预后的重要依据。
•形态学检验诊断对临床诊断疾病具有参考诊断、鉴别诊断、确定诊断价值。
体液常规形态学检查含义
◆体液细胞是指除血液以外的各种体液及其体液中的各种细胞，包括脱落于体液中的细胞。
◆各种体液，如胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液等，在完成一般性常规检验的基础上，将标本离心，取沉渣制成涂片，经瑞吉染色后，在显微镜下进行细胞形态学观察，出具检验诊断报告(细胞分类、肿瘤细胞、狼疮细胞、噬菌细胞、真菌、寄生虫和结晶等)。
◆该检查称之为体液常规(细胞)形态学检查。它是集基础理论、临床知识 、实验方法、涂片染色、实践经验于一体的综合技术。检查目的是提高检验质量，提升常规形态学检验应用价值。
体液标本种类
胸液、腹液、心包液、脑脊液、痰液、胃液、十二指肠液、胆囊液、胰液、羊水、精液、前列腺液、泪液、唾液、耳道分泌物、鼻腔分泌物、乳腺分泌物、阴道分泌物、尿道分泌物、肿块/囊肿液、脓肿液、引流液、关节腔积液、阴囊积液、肺泡灌洗液、腹膜透析液、胸腔冲洗液、腹/盆腔冲洗液、尿液、粪便等三十余种。
体液常规形态学检验内容
·理化检验
·细胞形态学
细胞计数
细胞分类及形态观察
·病原生物及其它形态观察
真菌、细菌、寄生虫、结晶等
临床实验室与病理科功能定位
◆医疗机构临床实验室是指对取自人体的各种标本进行生物学、微生物学、免疫学、化学、血液免疫学、血液学、生物物理学、细胞学等检验，为临床提供医学检验服务并出具检验报告的实验室。摘自《医疗机构临床实验室管理办法》卫医发[2006]73号
◆医疗机构病理科是对取自人体的各种器官、组织、细胞、体液及分泌物等标本，通过大体和显微镜观察，运用免疫组织化学、分子生物学、特殊染色以及电子显微镜等技术进行分析，结合病人的临床资料，做出疾病的病理诊断。
摘自《病理科建设与管理指南(试行)》 卫办医*发〔2009〕31号
怎样理解检验诊断
◆国家赋予检验医学的学科名称《临床检验诊断学(100208)》。
◆临床实验室(检验科)出具的检验报告即检验诊断报告，为临床诊断疾病提供依据。
◆检验诊断报告对临床诊断疾病具有参考诊断、鉴别诊断、确定诊断价值。
体液形态学检查的法规依据
·《医疗机构临床实验室管理办法》(卫生部 卫医发[2006]73号)
·《医疗机构临床检验项目目录》(国卫医发[2013]9号)
·《全国临床检验操作规程》(卫计委 第四版 [2015])
·《医学实验室质量和能力专用要求》(GB/T 22576-2008/ISO15189:2012)
·《医学实验室质量和能力认可准则》(CNAS-CL02 2012/ISO15189:2012)
·《医学实验室质量和能力认可准则在体液学检验领域的应用说明》(CNAS-CL41 2012)
体液形态学检验能否筛查肿瘤细胞
·2013年版《医疗机构临床检验项目目录》共包括检验项目1462项
临床体液、血液专业360项，
临床化学检验专业347项，
临床免疫、血清学专业458项，
临床微生物学专业152项，
临床分子生物学及细胞遗传学专业145项。
·《医疗机构临床检验项目目录》
临床体液、血液专业
胸腹水常规检查
胸腹水细胞学检查
脑脊液常规检查
脑脊液细胞学检查
各种穿刺液及分泌物细胞学检查
·《全国临床检验操作规程》(第四版 2015，3)
P175 粪便检查 乙状结肠癌、直肠癌患者的血性粪便涂片染色可见到成堆的癌细胞。
P178 脑脊液检验 染色分类法:脑脊液找到癌细胞是临床确诊脑膜癌的重要手段。
P182 痰液检验 肿瘤细胞见于原发性或转移性肺癌。
P184 支气管肺泡灌洗液检验 检查癌细胞有利于肺部肿瘤的诊断。
P185 浆膜腔积液检验 瑞吉染色分类。HE或巴氏染色找癌细胞。
P188 精液检验 精液中出现癌细胞可为生殖系统恶性肿瘤的诊断提供依据。
P194 前列腺液检验 前列腺癌时可见癌细胞。
体液恶性肿瘤细胞分级报告
✎未查见恶性细胞
✎查见核异质细胞
✎查见可疑恶性细胞
✎查见恶性细胞
恶性细胞若能确定是上皮源性的，则报告癌细胞;若能分型，则进一步报告为腺癌细胞。
恶性细胞若能确定是造血淋巴组织源性的，则报告白血病细胞、淋巴瘤细胞。
二、体液常规形态学检验诊断现状
现状
◆60家医院浆膜腔积液常规形态学检查现状调查
✎标本采集 86.7%为非抗凝标本
✎沉淀物制片 68%为涂抹法制片，20%为推片法制片
✎染色方法 88.33%采用瑞氏或瑞吉复合染色
◆细胞分类及报告
✎涂片瑞吉染色 88.33%
✎有核细胞分类 88.33%
✎不报告恶性细胞 81.67%
✎直接分类(单核、多核细胞) 11.67%
✎凝固标本不检验 85%
调查结果
◆调查结果表明:标本采集、沉淀物制片、涂片染色查找肿瘤细胞、凝固标本处置等存在的问题比较突出。
原因分析与对策
◆原因
质量意识不强、操作不规范、专业基本功不扎实等
◆对策
增强责任意识、服务意识、质量意识，加强形态学专业人才培养。
对于凝固标本不做细胞计数，但应把凝块细胞挤出，离心制片染色，作细胞分类及形态学观察。
现状
◆体液常规形态学检查越来越广泛的得到应用，从三级到二级医院，甚至到社区、乡镇医院。
◆涂片瑞吉染色为多数检验技术人员所接受、采用。
◆常规形态学图文报告部分地区已广泛应用，如浙江省各级医院。
◆体液常规形态学检验诊断为临床诊断疾病发挥了重要作用，其诊断价值不可替代。
三、体液常规形态学检验诊断展望
体液形态学检查的MICM
◆MICM是应用于血液系统白血病诊断分型的综合性检查。体液形态学检验诊断完全可以借助MICM检查，赋予新的检验内涵，用于恶性肿瘤和良性疾病的诊断与鉴别诊断。
Morphology(形态学)
✎细胞学涂片
✎冰冻切片
✎石蜡切片
✎TCT制片
染色方法：瑞吉染色、HE染色、巴氏染色
Immunology(免疫学)
✎流式细胞术
体液T淋巴细胞亚群分析用于诊断白血病、淋巴瘤
体液HLA-B27的检测辅助诊断强直性脊柱炎
体液定量分析肿瘤细胞DNA倍体
✎免疫细胞化学
体液细胞免疫化学染色，用于各种肿瘤细胞的鉴定(T、B细胞，肿瘤标记)
✎肿瘤标志物
浆膜腔积液肿瘤标志物检测，用于恶性肿瘤的辅助诊断
Cytogenetics(细胞遗传学)
✎染色体检查
体液细胞染色体及核型分析
体液恶性细胞常见多二倍体、超二倍体、亚二倍体、假二倍体、内复制和标志染色体
✎FISH(荧光原位杂交检测)
1.HER-2/neu基因、TOP2A基因检测 用于乳腺癌，指导其临床用药及预后判断。
2.TERC基因检测 ，有助于宫颈癌筛查和早期诊断。
3.p16基因检测 用于诊断膀胱癌及术后复发。
4.EGFR基因扩增 用于指导非小细胞肺癌患者临床用药。
5.ERG基因断裂重组 用于前列腺癌的早期诊断及判断预后
Molecular biology(分子生物学)
✎ 基因检测 PCR结核杆菌DNA检测、巨细胞病*DNA、EB病*DNA
✎ Exosomes(外泌体)胸腔积液exosomes的蛋白组学分析，用于恶性肿瘤的诊断
✎ DNA定量/倍体分析 尿液、胰液、浆膜积液、胆管液等的DNA倍体分析，用于恶性肿瘤的诊断
DNA自动细胞分析检测仪
体液形态学检验诊断自动化、标准化
国内临床血液体液专业规范性引用文件
·WS/T406-2012《临床血液学检验常规项目分析质量要求》
·WS/T347-2011《血细胞分析的校正指南》
·WS/T359-2011《血浆凝固实验血液标本的采集及处理指南》
·WS/T408-2012《临床化学设备线性评价指南》
·WS/T405-2012《血细胞分析参考区间》
·ECLM:2000 《欧洲尿液分析指南》
·CLSIGP16-A3:2009《尿液分析》
·CLSIH26-A2:2010《自动血液分析仪确认、验证和质量保证》
体液检查标准化文件
国外: CLSI-IFCC C49-A
Analysis of body fluids inclinical chemistry, approved guideline(2007)
国外: CLSI-IFCC H56-A
Body fluid analysisfor cellular composition (in LabHematology); approved guideline (2006)
国外: CLSI-IFCC H56-A
Body fluid analysis for cellular composition (in Lab Hematology);approved guideline (2006)
✎标本种类：脑脊液、胸水、腹水、心包液、腹膜冲洗液、腹膜透析液、滑膜液、支气管肺泡灌洗液
✎标本采集、处理、运输细胞定量检测形态学分析
✎其它检查：免疫细胞化学、流式细胞仪、细胞遗传学
✎分析后标本贮存
自动化体液细胞分析仪
迈瑞BC-6900体液WBC,/RBC计数,白细胞分类
XN系列/XE-5000体液WBC,/RBC计数,HLC计数，白细胞分类
DxH800,体液WBC,/RBC计数, 白细胞分类
ADVIA2120,体液WBC,/RBC计数，脑脊液增加白细胞分类(半自动)
自动化体液细胞分析仪性能
品牌
SYSMEX
Bayer
Mindray
Backman Coulter
型号
XN
XE-5000
XT-4000i
ADVIA 2120
BC-6900
DxH800
标本种类
脑脊液、腹透液、浆膜腔积液、滑膜液
脑脊液、胸腹水
脑脊液、腹透液、浆膜腔积液、滑膜液
脑脊液、腹透液、浆膜腔积液、滑膜液
检测低限
WBC> 10 / µl
RBC> 1,000 / µl
WBC> 200 / µl
RBC> 10,000 / µl
高值线性
RBC <5000 x 103 / µl
RBC<1500 / µl
RBC <5000 x 103 / µl
WBC <10 x 103 / µl
RBC :1-6200 x 103 / µl
WBC :0.02-89 x 103 / µl
细胞分类
单核细胞、多核细胞、嗜酸细胞、HF细胞
只能分类脑脊液
单核细胞、多核细胞、嗜酸细胞、HF细胞等
单核细胞、多核细胞等
迈瑞流水线
迈瑞检测原理
迈瑞-体液散点图和直方图
迈瑞-体液参数
系
中文名称
英文名称
缩写
白细胞系(6项)
体液白细胞数目
White Blood Cell count-body fluid
WBC-BF
体液总有核细胞数目
Total nucleated cell count-body fluid
TC-BF#
单个核细胞数目
Mononuclear cell number
MN#
单个核细胞百分比
Mononuclear cell percentage
MN%
多个核细胞数目
Polymorphonuclear cell number
PMN#
多个核细胞百分比
Polymorphonuclear cell percentage
PMN%
红细胞系(1项)
体液红细胞数目
Red Blood Cell count-body fluid
RBC-BF
中文名称
英文名称
缩写
体液嗜酸性粒细胞数目
Eosinophils number- body fluid
Eos-BF#
体液嗜酸性粒细胞比例
Eosinophils percentage- body fluid
Eos-BF%
体液高荧光强度细胞数目
High fluorescent cell number- body fluid
HF-BF#
体液高荧光强度细胞比例
High fluorescent cell percentage- body fluid
HF-BF%
体液红细胞数目
Red Blood Cell count-body fluid
RBC-BF(R)
注：
RBC-BF研究参数的精度比报告参数的精度提高一位，即RBC-BF报告参数小数点后保留三位有效数字，
RBC-BF研究参数小数点后保留四位有效数字。
胸腔积液
患者，男，41岁。长期胸腔积液待查，抽取胸腔积液进行常规检查。胸水呈*色、浑浊，仪器(BC-6900)结果提示HF-BF增高，散点图异常。涂片染色镜检查见癌细胞及癌细胞团。
XN流水线
Sysmex体液系列-参数、散点图、直方图
支气管肺泡灌洗液
·患者男，59岁，CT示右肺占位。
·肺泡灌洗液常规细胞形态学检查：查见大量癌细胞。
·仪器(XN)结果：HF659.6/100WBC，HF参数明显增高，散点图异常，仪器与镜检相符。
· 诊断：右肺腺癌
XN系列
自动化体液分析模式的优势
•血液体液一体机提供了体液常规检查的新技术
•HF、散点图参数是筛查肿瘤细胞的电子眼
•嗜酸细胞参数填补了一些体液常规检查如：脑脊液、透析液等手工直接分类的缺陷
•自动化体液分析检测简便、快速、准确、安全，奠定了体液检查标准化的基础。
自动化血细胞形态分类识别技术已拓展到体液细胞形态分类
瑞典 Cellavision公司 DM96
北京赛尔蒂扶科技发展有限公司 BCM-3
自主知识产权产品获5项发明专利和软件著作权
FA160自动粪便形态智能识别系统
自主知识产权的智能识别分析仪
AVE-562全自动粪便分析仪
自主知识产权的智能识别分析仪
互联网+形态学检验
·互联网+形态学智慧检验技术的显著特点是显微镜图像的数字化。数字化图像可通过自动化、信息化技术(移动互联网、物联网、云计算、大数据)与远程专业技术人员分享图像采集、存储、再传输及图像鉴定。这种技术称为“虚拟显微镜检查”。
·智慧形态学实验室是在目前自动化、流水线细胞分析模式基础上，由单个实验室封闭式检验模式转变为网络化、数字化、智能化、专业化、国际化的开放式形态学检验诊断模式。
智慧形态学技术意义
•符合国家“互联网+”行动的战略方针
互联网+形态学技术是细胞形态学技术发展的一次革命，具有里程碑意义。
•符合国家医疗改革分级诊疗的*策导向
各级医院可以共享优质资源，中小医院能够分享到大医院的优质技术资源，在分级诊疗中发挥重要作用。
•符合医疗以病人为中心的服务宗旨
可以化解边远地区病人出门难、看病难、看病贵的困扰。
•符合加快培养形态学检验专业人才的客观需求
可以化解中小医院检验人员进修难、培训难、形态学人才培养难的困扰。
构建检验诊断系统工程
创新检验诊断报告模式
◆三个方面
✎质量管理体系：国家法规办法、操作规程、ISO15189等。
✎检验检测系统：如仪器、试剂、方法、流程等规范统一。
✎检验诊断报告模式
检验诊断报告模式
◆报告模式方案
✎检验检测参数性检验诊断报告
✎分析判断提示性检验诊断报告
各个专业全覆盖，临检、生化、免疫、微生物、分子基因等
◆报告模式适宜度把握
✎参考值范围的检验检测参数性检验诊断报告采用现行报告方式
✎分析判断提示性检验诊断报告依据国家规定的原则把握(具有专业和法理的权威性)。
◆依据国家赋予临床实验室的功能定位
为临床提供医学检验服务并出具检验报告
◆依据国家赋予检验医学学科的专业、学术定位
临床检验诊断学(105108/100208)
因此，检验科出具的无论是检验检测参数性检验诊断报告，还是分析判断提示性检验诊断报告，对于临床诊断疾病都具有参考诊断、鉴别诊断、确定诊断价值，是临床诊疗疾病的依据，甚至是某些疾病诊疗的 的金指标。